Die Methode des Alkohol Trinkens
Alkohol bevorzugende P, HAD und AA Ratten bekommen nach Belieben Zugang, entweder zu Wasser oder zu 5% und 20% Ethanollösung (v/v). Alle Ratten durchliefen einen 2-wöchigen Entzugszyklus nach 8 Wochen dauerhafter Alkoholverfügbarkeit. Nach der Entzugsmethode bekamen die Ratten erneut Zugang zum Alkohol und drei weitere Entzugsperioden wurden durchgeführt, ähnlich einer früheren Darstellung unserer Gruppe (Vengeliene et al., 2003). Die Langzeit Alkoholtrinkmethode schließt alle Entzugsphasen, die insgesamt 52 Wochen angedauert haben, mit ein. Zum Vergleich haben alle 3-jährigen und im Gewicht zusammenpassenden Kontrollgruppen der P, HAD und AA Ratten genau die gleichen Abwicklungsprozeduren für die gesamte Zeit des Experiments durchlaufen, aber keinen Alkohol bekommen.
Etablierung einer Gehirn/ Organbank
Tieren wurde für 6 Stunden Nahrung und Flüssigkeit entzogen, um zu garantieren, dass die Blutalkoholkonzentrationen bei 0 liegen (um direkte Alkoholeffekte auf Genexpression zu vermeiden); dann wurden Tiere geopfert, indem sie CO2 ausgesetzt und enthauptet wurden. Die Gehirne wurden schnell entfernt, in ein Glas mit Iso-Pentan (Sigma-Aldrich Co., St. Louis, MO, USA) gegeben und 5 Minuten auf Trockeneis gelegt. Danach wurden die Gehirne in Parafilm und Alufolie eingewickelt und bei -80° C aufbewahrt. Andere Organe, die auch durch chronische Alkoholaufnahme beeinflusst werden, wurden ebenfalls schnell entfernt und in flüssigem Nitrogen aufbewahrt. Diese beinhalten die Speiseröhre, Speicheldrüsen, Magen, Herz, Leber, Blut, Darm und Bauchspeicheldrüse.
Vengeliene V, Siegmund S, Singer MV, Sinclair JD, Li TK, Spanagel R (2003) A comparative study on alcohol-preferring rat lines: effects of deprivation and stress phases on voluntary alcohol intake. Alcohol Clin Exp Res 27:1048-1054
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